雅各布/伊薇
雅各布和伊薇率领着犯罪集团“黑鸦帮”对抗圣殿骑士旗下的暴徒帮。相比于冷静而隐秘的姐姐，雅各布显得鲁莽而叛逆。他从很小的时候就开始接受刺客训练，成为了一个潜行和战斗皆通的刺客大师，当然他更倾向于后者。论起事迹，还是他的姐姐更具魅力，她干掉了开膛手杰克。
谢伊
大多数刺客信条的主角或多或少都是刺客组织的，但谢伊·科马克是个例外。作为《刺客信条：反叛》的主角，谢伊让我们转向圣殿骑士追杀刺客，这个角度令人耳目一新。谢伊在加入圣殿骑士后，成为了刺客们致命的敌人。他所受到的刺客训练使他能轻易消灭任何刺客潜行者，他建立起了北美圣殿骑士的架构，直到那个狂战士的出现。
阿尔诺
阿尔诺被称之为“低配版埃奇奥”，两人都有贵族血统，年轻时无忧无虑，爱惹麻烦，都在圣殿骑士手中遭受了家庭损失，最后都被兄弟会接受，在后来的生活中变得更加明智。但是《刺客信条：大革命》刚发售时的差评让这个角色错过了成为“法国大革命三部曲”主角的机会，戏份不足缺乏传奇经历，因此排名靠后。
艾沃尔
艾沃尔是一个勇猛的维京战士，依靠高超的战斗技巧，她可以轻而易举地击败多个敌人。她能熟练地双持武器战斗，哪怕两把都是重武器也不在话下，有时也会同时使用两面盾牌作为武器。她反应十分敏捷，无论什么样的攻击都可以避开、招架或是格挡。相比之下，潜行似乎变得没那么必要，不过狂战士也可以算是刺客。
巴辛姆
巴辛姆排名考前是因为他出现在两个作品，首次登场于2020年的《刺客信条：英灵殿》，之后成为2023年游戏《刺客信条：幻景》的主角，巴辛姆的经历非常传奇，他的真实身份其实是伊述人“洛基”的转世圣者，利用世界树保留自己意识，在数千年前的大灾变后凭借人类之身觉醒。
巴耶克
锡瓦的巴耶克是埃及最后的守护者之一，后来他和他的妻子艾雅一起成为了无形者的创始人之一，这是刺客兄弟会有组织的最早化身之一。按照时间顺序，巴耶克是系列游戏中的第一位把无名指用袖剑砍下来的主角，后来这个传统将被用来证明自己对刺客兄弟会的信条的忠诚，直到阿泰尔改进了袖剑。因为《刺客信条：起源》首次引入了RPG系统，因此巴耶克对高等级敌人无能为力，所以显得弱一点。
卡珊德拉/阿历克西欧斯
卡珊德拉与阿历克西欧斯是一对姐弟，根据官方设定姐姐卡珊德拉最终杀了弟弟，因此卡珊德拉是《刺客信条：奥德赛》的真正主角，无论按寿命还是实力来排名，卡珊德拉都会是第一名，她活到了2018年！但可惜登场作品比较少，身份也更像是圣斗士而不是刺客，影响力终究不如前几位，但斯巴达人才不在乎什么排名，马拉卡！
康纳·肯维
康纳·肯维凭借身体素质和格斗能力进入前五，因为他开创了刺客信条里的狂战士流派，真正做到了“没有人知道他来过”，因为已经没有活人了……按设定来说，康纳·肯维的真名应该是拉通哈给顿，他几乎仅凭一人之力人，就摧毁了圣殿骑士在北美的势力，北美圣殿骑士因此受到的打击十分沉重，几近瘫痪。此外，康纳还成功避免华盛顿被伊甸苹果的力量所侵蚀，回避了他没有成为刺客的平行世界中噩梦般的一系列事件。
爱德华·肯维
《刺客信条IV：黑旗》在玩家心中占有特殊的地位，自此之后海战成为刺客信条系列不可或缺的元素。其主角爱德华·肯维也以其独特的海盗形象而深入人心，如果在海上肯维当属第一，但可惜人总要在陆地上生活，肯维晚年被圣殿骑士最高大师伯奇雇凶杀害，未得善终，但他在海上太帅了，进入前三不是问题。
埃奇奥
埃齐奥·奥迪托雷·达·佛罗伦萨是刺客信条系列中人气最高的角色，登场作品最多，更是三部主线游戏的主角，三部曲将埃齐奥塑造的相当好，让他变成了一个更加复杂且富有魅力的传奇角色。埃齐奥是文艺复兴时期的一名佛罗伦萨贵族，同时还是一名刺客大师，在1503年到1513年间担任意大利刺客兄弟会的导师。十年冒险之后，埃齐奥结束了自己的刺客生涯，在协助教导中国刺客邵君一段时间之后，埃齐奥因心脏病突发而去世，享年65岁。
阿泰尔
阿泰尔从小就接受刺客的训练，24岁时就成为了刺客大师，是史上第一个在这种年纪就成为刺客大师的人，但因为偷取第二苹果失败，导致圣殿骑士进攻刺客总部。因此，阿泰尔被降级至刺客新手，踏上了寻求救赎的冒险之路，最后他成功复仇，并带领刺客组织走进了一个更为隐秘的崭新时代。
在其后的生涯中，阿泰尔多次挫败了圣殿骑士的计划，还阻止了成吉思汗的铁骑继续向西进军。阿泰尔的事迹在去世之后仍在刺客组织内广为流传，影响了埃齐奥等众多刺客，登场作品仅次于埃奇奥，第一部《刺客信条》的主角阿泰尔具有开创之功，日后所有刺客信条游戏都离不开最初的模样，排名第一实至名归。